相關蛋白1（FGL1）檢測ELISA試劑盒檢測原理:
相關蛋白1(FGL1)檢測ELISA試劑盒檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心法：抗相關蛋白1(FGL1)單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)會與單抗結合，游離的成份被洗去。加入酶標抗體，抗相關蛋白1(FGL1)抗體與結合在單抗上的相關蛋白1(FGL1)結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度。
相關蛋白1(FGL1)檢測試劑盒樣品收集:
1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿：抗凝劑使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會
影響測量結果），稱重后將碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)上清：取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當倍數(shù)稀釋（建議先做預實驗，以確定稀釋倍數(shù)）。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
上一篇 ELISA實驗正面解析血清學反應的特點原理 下一篇 植物苯（LPA）ELISA試劑盒操作程序總結
